Rosa26定点转基因小鼠订制
Gt(ROSA)26Sor或称Rosa26基因位于小鼠6号染色体，是一个反义长链非编码RNA基因，已被证明在大部分组织和细胞中都有表达。表达比较活跃的基因区域因为需要转录因子的进入基因组结构不会被异染色质化，因此在这个区域定点插入外源DNA，在各组织中表达的可能性都非常高。Gt(ROSA)26Sor（Rosa26）基因位点已被广泛应用于制备定点条件性转基因小鼠，此类模型中外源基因的表达可受组织特异性启动子或药物诱导调控。
I ES细胞同源重组技术
原理 利用Cre-Loxp系统对目的基因进行可诱导表达调控，当两个Loxp位点位于同一染色体上且方向一致时，Cre重组酶会特异性的将两个Loxp位点间的序列切除。构建Rosa26-(SA /pCAG)-loxp-Stop-loxp-cDNA-pA打靶载体，转入ES细胞，获得在Rosa26目的位置发生正确同源重组的ES克隆，并将其注射到小鼠囊胚内细胞团，获得嵌合鼠，通过与野生型小鼠繁殖得到正确同源重组ES细胞来源的Knockin小鼠。Knockin小鼠可与各类表达Cre重组酶的小鼠杂交，获得组织特异性表达的小鼠模型。服务周期 7-15个月
II Crispr/Cas9技术
原理 根据Rosa26基因序列设计合成sgRNA，构建含同源序列和目的序列的片段，与Cas9核酸酶mRNA共同注射到小鼠受精卵胞质，Cas9 mRNA、sgRNA与基因组靶序列结合并切割双链DNA，以含目的片段的同源序列为模版修复基因组DNA，最终获得在Rosa26基因intron中定点插入片段的小鼠。
服务周期 6-9个月
Rosa26定点转基因打靶示意图
